斷奶仔豬豬瘟單針免疫的臨床應用及效果分析

張聚民，卞蘇舒，蘇 鵬，高連軍

(1.杭州市臨安區畜牧農機發(fā)展中心，杭州 臨安 311300；
2.杭州市臨安區河橋動(dòng)物疫病診療所)

豬對豬瘟病毒(CSFV)具有較強的易感性[1]，無(wú)免疫力的豬群，一旦感染，通常引起大規模急性爆發(fā)，發(fā)病率和死亡率超過(guò)80%，損失十分嚴重[2]。全面實(shí)施疫苗免疫計劃，能有效地控制豬瘟的大規模爆發(fā)流行，但散發(fā)流行依然存在，甚至出現局部爆發(fā)[3]。臨安區規模豬場(chǎng)豬瘟一直實(shí)行程序化多次免疫，但即使這樣，臨床上慢性感染或非典型性感染也較為常見(jiàn)。在當前豬病防控形勢下，探索豬瘟單針免疫而實(shí)現長(cháng)久保護在生產(chǎn)上具有重要意義，為此，我們對斷奶仔豬進(jìn)行豬瘟單針免疫嘗試，并測定其不同日齡免疫抗體水平，驗證單針免疫的可行性。

1.1試驗動(dòng)物 選擇臨安區某豬場(chǎng)，該場(chǎng)生產(chǎn)整體穩定，豬瘟免疫長(cháng)期使用國產(chǎn)同一品牌豬瘟細胞弱毒苗，近兩年該場(chǎng)商品豬豬瘟二免抗體合格率80%以上，符合國家免疫要求，保育豬偶見(jiàn)持續慢性腹瀉致僵現象。本試驗豬選取父本為同一杜洛克公豬，母本為經(jīng)產(chǎn)長(cháng)加母豬，于2021年8月9日所產(chǎn)的4窩健康仔豬共52頭作為試驗基礎群。

1.2試驗設計 25日齡斷奶，30日齡按公母比例相近，體重接近的原則從基礎群選取仔豬40頭分成兩組，試驗組和對照組各20頭(表1)，空腹稱(chēng)重記錄，采集血樣2.5 mL/頭，而后試驗組和對照組分別注射1頭份豬瘟弱毒苗(A)和2頭份豬瘟弱毒苗(B)。于60日齡采血(2.5 mL/份)檢測，采血后試驗組注射生理鹽水2 mL，對照組注射豬瘟疫苗(B)4頭份(2 mL)；
于90日齡和180日齡分別采血檢測，每份2.5 mL，并在180日齡兩組空腹秤重。

試驗組豬瘟疫苗(A)：江蘇勃林格殷格翰生物制品有限公司生產(chǎn)，獸藥生字101597550批號FC2020002，(C株，PK/WRL傳代細胞源)。

對照組豬瘟疫苗(B): 某實(shí)業(yè)股份有限公司生物藥廠(chǎng)生產(chǎn)，獸藥生字140401115批號20201217，(細胞源)。

表1 試驗分組

1.3試驗環(huán)境及飼養管理 試驗豬在同一育肥舍飼養，試驗期間其飼喂方式、飼料種類(lèi)、飼養密度、溫度、通風(fēng)等條件完全一致，每欄10頭，密度0.83頭/m2，溫度在26-30 ℃之間，通風(fēng)良好；
保育料喂至90日齡，而后改用育肥料至180日齡；
試驗期間兩組皆偶有腹瀉、咳嗽，采用口服或注射方式藥物治療，預后良好；
除豬瘟免疫外其它免疫完全一致，其主要免疫有口蹄疫、偽狂犬、圓環(huán)病毒等。

1.4血樣采集及免疫抗體檢測 仔豬分別于30、60、90、180日齡時(shí)，用7 #采血器采集全血2.5 mL，離心分離血清，用ELISA方法檢測豬瘟抗體。

豬瘟抗體判定標準：陽(yáng)性PI≥0.4，陰性PI<0.4。

豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒：北京金諾百泰生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號20210208。

1.5統計分析 采用Excel軟件整理試驗數據，用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，P<0.05為差異顯著(zhù)。*代表P<0.05，**代表P<0.01，***代表P<0.001。

2.1免疫后仔豬體重變化監測與分析 30日齡的仔豬免疫前稱(chēng)重，并于免疫后150 d(即為180日齡)時(shí)再次稱(chēng)重，然后進(jìn)行比較。試驗結果表明試驗組與對照組仔豬在30日齡和180日齡的平均體重均沒(méi)有顯著(zhù)性差異(P>0.05)(圖1)。通過(guò)對兩組仔豬體重的變異系數分析顯示，在180日齡時(shí)試驗組仔豬體重的變異系數小于對照組，說(shuō)明經(jīng)過(guò)免疫后試驗組仔豬群體體重均一度更高(表2)。

圖1 不同日齡仔豬體重差異性分析

表2 不同日齡仔豬體重均勻度分析

2.2仔豬免疫后豬瘟抗體水平

2.2.1母源抗體 免疫前即30日齡時(shí)試驗組與對照組仔豬豬瘟母源抗體PI值均小于0.4，抗體水平檢測呈陰性，且試驗組與對照組不存在顯著(zhù)性差異(P>0.05)，故試驗母源抗體干擾差異性影響較??；

2.2.2免疫抗體水平 對兩組仔豬進(jìn)行豬瘟抗體水平的檢測,結果表明在免疫后的各階段試驗組與對照組仔豬豬瘟抗體PI值均大于0.4，說(shuō)明抗體水平檢測皆呈陽(yáng)性，但試驗組抗體上升更快，高位平穩維持時(shí)間更長(cháng)，且抗體平均水平試驗組均明顯高于對照組(圖2)。同時(shí)在60日齡和90日齡時(shí)試驗組抗體水平顯著(zhù)性高于對照組(P<0.001)；
但在180日齡時(shí)試驗組與對照組抗體水平不存在顯著(zhù)性差異(P>0.05)(圖3)。

圖2 不同免疫組仔豬豬瘟抗體檢測結果

圖3 不同免疫組仔豬豬瘟抗體平均值加減標準差

2.2.3抗體的合格率和均一度 對兩組仔豬免疫后抗體的合格率和均一度進(jìn)行分析，結果表明試驗組仔豬免疫后不同日齡抗體合格率均為100%，而對照組仔豬在60、90和180日齡時(shí)抗體合格率分別為80%、100%和90%；
此外試驗組仔豬在60、90和180日齡時(shí)群體抗體水平的變異系數均明顯小于對照組，從而說(shuō)明試驗組仔豬免疫后整體的抗體水平均一度較好，均維持在較高水平(表3)。

表3 不同免疫組仔豬豬瘟抗體合格率及均勻度

2.3經(jīng)濟效益分析 從表4可見(jiàn)綜合人工成本因素，試驗組相比對照組節約成本1.2元/頭，對規模豬場(chǎng)而言使用單針免疫方法有較好地節約人工成本的效果。

表4 疫苗使用成本分析

豬瘟是影響生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要疫病，預防該疾病的有效措施是接種疫苗，而抗體監測是評價(jià)疫苗接種效果的重要手段之一[4]。本研究結果顯示仔豬30日齡時(shí)豬瘟抗體水平即為免疫前仔豬的母源抗體的水平，試驗組和對照組合格率均為0，說(shuō)明在30日齡時(shí)仔豬的母源抗體基本耗盡，不存在對本試驗產(chǎn)生干擾。試驗組與對照組免疫后豬瘟抗體合格率均高于國家要求的70%合格率，試驗組單針免疫在60日齡時(shí)就可以使整體的合格率達到100%，且群體有很高的抗體整齊度。而對照組在60日齡時(shí)豬瘟抗體合格率為80%，未達到涂長(cháng)春[5]提出的豬瘟群體免疫保護率高于85%時(shí)才能避免豬瘟發(fā)生的標準。對照組二次免疫之后即仔豬90日齡和180日齡抗體合格率分別為100%和90%，說(shuō)明二次免疫與一次免疫相比,免疫效果有了明顯的提升。而對于試驗組的免疫疫苗，一次免疫后豬瘟抗體就可以達到理想的水平，且群體的抗體水平整齊度較高，說(shuō)明對于豬瘟的防控來(lái)說(shuō)，疫苗的選擇非常重要，這與李滿(mǎn)等[6]的研究結論一致。

本研究表明,選擇合適的豬瘟疫苗對當前的豬場(chǎng)僅僅實(shí)施一次免疫即可使免疫豬群獲得較高和整齊的免疫抗體水平,有效地防控豬瘟疫病的發(fā)生，同時(shí)也可減少免疫次數，降低人力成本和生物安全風(fēng)險，這在生產(chǎn)實(shí)際中具有較大的推廣意義。