周世強何勝山屈元元羅永吳代福黃炎李德生張和民
（中國大熊貓保護研究中心，大熊貓國家公園珍稀動(dòng)物保護生物學(xué)國家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗室，都江堰 611830）
食物、水和隱蔽物是構成野生動(dòng)物棲息地結構的重要組成因子，因食物的營(yíng)養成分及含量、消化率、數量和質(zhì)量等存在時(shí)空差異，從而驅使野生動(dòng)物形成最佳覓食策略、飲食選擇特性和時(shí)空活動(dòng)格局，如季節性食物變化(Seasonal dietary shift)、飲食生態(tài)位轉換(Dietary niche switching)和海拔遷移模式(Altitude migration model)等(Goldizenet al.,1988;Fryxell,1991;Rubenstein and Wikelski,2003;Lambert and Rothman,2015;Houet al.,2018;Heckeret al.,2021)。同時(shí)，不同生命周期階段的動(dòng)物，通過(guò)獲取不同養分來(lái)應對營(yíng)養供給與需求的變化，以便獲得充足的營(yíng)養和能量，促進(jìn)自身的健康成長(cháng)，形成發(fā)育性食性轉換(Developmental dietary transition)規律(Raubenheimeret al.,2012)。
大熊貓(Ailuropoda melanoleuca)為我國國寶，世界生物多樣性保護的標志性物種，大熊貓國家公園的旗艦動(dòng)物(薛冰潔等，2017)。大熊貓屬食肉目(Carnivora)熊科(Ursidae)大熊貓屬(Ailuropoda)(Sarich,1973;Swaisgoodet al.,2020)，具有食肉動(dòng)物特有的簡(jiǎn)單胃和短腸道，經(jīng)過(guò)長(cháng)期的演化，已特化成以亞高山竹類(lèi)為主要食物的草食性動(dòng)物，竹子占據其食物組分的99%以上(Dierenfeldet al.,1982;Schalleret al.,1985；
胡錦矗，2001；
潘文石等，2001;Nieet al.,2015;Weiet al.,2015)。多年來(lái)，科研人員針對不同山系野生大熊貓的主食竹種類(lèi)，竹筍、竹莖和竹葉的營(yíng)養成分和次生化合物，大熊貓生理機能與代謝途徑，大熊貓不同季節的覓食策略和遷移習性等方面開(kāi)展了深入研究，取得了大量數據，基本摸清了大熊貓的季節性食性轉換規律(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985；
潘文石等，2001;Garshelis,2004;Nieet al.,2015;Weiet al.,2015；
李亞軍等，2016；
王丹林等，2017；
董冰楠等，2017;Huanget al.,2018;Nieet al.,2019;Wanget al.,2020；
國家林業(yè)和草原局，2021；
周世強，2021)。相對而言，大熊貓發(fā)育性食性轉換過(guò)程的研究，因受限于野外數據獲取的難度和圈養目的的影響，至今沒(méi)有較為完整的證據資料，僅有片段化的描述性記錄，如對邛崍山系(臥龍自然保護區)和秦嶺山系(佛坪、長(cháng)青自然保護區)野生大熊貓幼仔不同年齡階段取食母乳和竹子的研究(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Luet al.,1994；
胡錦矗，2001;Zhuet al.,2001)。在人工圈養條件下，為了使母獸盡快進(jìn)入下一個(gè)發(fā)情期，參加第二年的繁殖，幼仔一般在4~6月齡人工斷奶，飼喂配方奶與精飼料，以及富含大量纖維素和水分的竹筍、嫩竹和竹葉等食物，此飼養模式無(wú)法獲得大熊貓發(fā)育性食性轉換的真實(shí)數據(Penget al.,2001；
張和民等，2003；
張志和和魏輔文，2006)。因此，開(kāi)展大熊貓幼仔食性轉換的研究，不僅可以洞悉大熊貓幼仔的覓食行為策略和生長(cháng)發(fā)育規律，而且還能夠為大熊貓種群、棲息地和食物資源的保護提供理論支撐。
為此，本文基于中國大熊貓保護研究中心(以下簡(jiǎn)稱(chēng)：熊貓中心)2010—2020年的圈養大熊貓野化培訓數據，分析大熊貓行為構成和糞便組分，探討野化培訓大熊貓幼仔的發(fā)育性食性轉換模式和季節性食性轉換規律。目的在于：(1)利用母獸帶仔野化培訓期間幼仔與母獸共同生活時(shí)間較長(cháng)的契機，獲得大熊貓幼仔食性轉換過(guò)程中較為完整的數據，清晰了解其食性轉換模式；
(2)比較野化培訓大熊貓與野生大熊貓的發(fā)育性和季節性食性轉換是否具有相似的規律，為今后提高圈養大熊貓幼仔的生存力提供參考，為建立大熊貓野化放歸的技術(shù)流程與評價(jià)體系奠定基礎。
2010—2020年參與野化培訓的大熊貓幼仔，經(jīng)專(zhuān)家評估后達到放歸野外標準的個(gè)體，共計15只(雄性3只，雌性12只)(表1)。每只個(gè)體參與野化培訓的平均時(shí)長(cháng)為821 d(最短713 d，最長(cháng)1 422 d)；
與母獸共同生活的平均時(shí)長(cháng)為746 d(最短197 d，最長(cháng)965 d)。4只大熊貓幼仔(“淘淘”和“華嬌”，“張想”和“張夢(mèng)”)的母獸分別是野外救護的大熊貓“草草”和“張卡”，其余幼仔的母獸均來(lái)自人工圈養繁殖的個(gè)體。
表1 2010—2020年母獸帶仔野化培訓的大熊貓幼仔Table 1 Information of pandas undergoing pre-release training while reared by mothers from 2010 to 2020
在總結圈養繁殖大熊貓亞成體“祥祥”野化放歸失敗的基礎上，熊貓中心于2008年初提出了“母獸帶仔野化培訓”的理念與方法(李德生等，2011；
周世強等，2012；
張和民等，2013)。所謂“母獸帶仔野化培訓”就是參與野化培訓的母獸在發(fā)情配種后，首先轉運至第一階段野化培訓圈(半野化圈)生活，并在該野化圈中妊娠、分娩和育幼；
在幼仔生長(cháng)到6月齡或1歲多之后，再將母獸和幼仔一同轉移到第二階段野化培訓圈(野生大熊貓棲息地內所建野化圈)，幼仔跟隨母獸學(xué)習野外生存技能(空間定位、食物選擇、生境利用、水源尋找、警戒逃離等)；
在幼仔1.5~2.5歲，經(jīng)專(zhuān)家評估后，合格的野化培訓幼仔適時(shí)放歸野外(野生大熊貓小種群區域)。在野化培訓期間，對大熊貓幼仔既不進(jìn)行強制斷奶，也不提供任何人工食物，且盡量減少人為活動(dòng)對幼仔培訓的影響(近距離觀(guān)察或接觸大熊貓幼仔時(shí)，工作人員需穿戴熊貓偽裝服、涂抹大熊貓尿液或糞便)，僅在秋冬季為母獸提供輔助性食物，如精飼料、竹筍等。
1.3.1 第一階段野化培訓圈
第一階段野化培訓圈位于大熊貓國家公園臥龍片區的核桃坪區域，為大熊貓中心臥龍核桃坪基地所在地，海拔1 820 m，年平均氣溫8.0℃，最冷月(1月)均溫-2.6℃、最熱月(7月)均溫16.7℃。該野化圈為半人工環(huán)境，共建有3個(gè)由室外活動(dòng)場(chǎng)(面積2 300~3 200 m2)和內室(20 m2)所組成的野化培訓圈，四周安裝紅外視頻監控系統(Surveillance Camera Digital Monitoring System,SCDMS)，用于監測大熊貓活動(dòng)，圈內設有自動(dòng)供水系統與流動(dòng)型飲水池(圖1)。
第一階段野化培訓圈內主要包括人工針葉林、落葉闊葉林與灌草叢等生境斑塊。喬木層郁閉度0.1~0.6，平均胸徑17~23 cm，平均樹(shù)高7.5~12.0 m。灌草植物蓋度25%~100%，平均高度40~70 cm。
1.3.2 第二階段野化培訓圈
第二階段野化培訓圈建于大熊貓國家公園臥龍片區的核桃坪后山和天臺山兩個(gè)區域，都屬于大熊貓的自然棲息地并常年有野生大熊貓生活其間(圖1)。
核桃坪后山區域的野化培訓圈由2個(gè)適應圈構成，海拔2 050~2 500 m，平均坡度20°~30°，年平均最高氣溫15℃，年平均最低氣溫4.7℃，空氣相對濕度達95%。該野化培訓圈先后培訓了大熊貓“淘淘”、“張想”、“新媛”、“雪雪”、“冉冉”和“潘旺”。1號培訓圈面積4 hm2，四周采用鐵絲網(wǎng)和鋼板進(jìn)行隔離。圈內主要分布有拐棍竹(Fargesia robusta)和短錐玉山竹(Yushania brevipaniculata)兩種大熊貓主食竹種，拐棍竹林占竹林面積的95%以上。其植被類(lèi)型為落葉闊葉林，是臥龍野生大熊貓的最佳棲息地(落葉闊葉林、針闊混交林和亞高山暗針葉林)之一(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985；
臥龍自然保護區管理局等，1987)。2號培訓圈面積約24 hm2，位于1號圈的上部，氣溫與1號圈相似。使用電網(wǎng)將培訓圈分成三部分，從北到南依次是A區、B區和C區。四周?chē)鷻诓捎酶邏好}沖電網(wǎng)和鐵絲網(wǎng)進(jìn)行隔離，圈內安裝170個(gè)槍機或球機式遠紅外視頻監控系統。圈內的大熊貓主食竹和植被類(lèi)型與1號圈基本相似，圈內有2~3處常年流水的小溪并建有專(zhuān)門(mén)的供水系統，以備野化培訓大熊貓母幼飲水之用。
天臺山區域的野化培訓圈被劃分成面積大小各異的5個(gè)適應圈，隔斷及四周采用高壓脈沖電網(wǎng)和鐵絲網(wǎng)分隔，并建有多個(gè)隔離籠，以便對大熊貓母獸和幼仔進(jìn)行體況檢查、體重監測和回捕監管。培訓圈內分布有多個(gè)常年流水的溪流，能夠滿(mǎn)足大熊貓母獸和幼仔的飲水需求。野化培訓圈海拔2 400~3 010 m，年平均氣溫4.6℃，極端最低氣溫-10.2℃，極端最高氣溫25.5℃；
最大面積47.89×104m2，最小面積23.97×104m2，總面積約1 km2；
坡度30°~45°。大熊貓“張夢(mèng)”、“華妍”、“華嬌”、“八喜”、“映雪”、“琴心”、“小核桃”、“冉冉”、“潘旺”、“鋼镚兒”和“田田”先后培訓于此(圖1)。森林植被類(lèi)型為以岷江冷杉(Abies faxoniana)、鐵杉(Tsuga chinensis)、樺木(Betulasp.)、槭樹(shù)(Acersp.)為優(yōu)勢樹(shù)種構成的針闊混交林和亞高山暗針葉林，僅1號野化培訓圈內有小面積的灌草叢。1、2號野化圈內分布有大量的拐棍竹林(72.17%)和冷箭竹林(Bashania faberi)(20.44%)，還生長(cháng)著(zhù)小面積(ca.54 400 m2)的短錐玉山竹林；
其余野化培訓圈僅有拐棍竹作為培訓大熊貓的主食竹種，占據空間面積的95%以上。
圖1 母獸帶仔野化培訓大熊貓第一階段和第二階段培訓圈位置示意圖.圖中數字和大寫(xiě)字母分別為面積不同的野化培訓區Fig.1 Enclosure site map of mother-reared pandas undergoing pre-release training in the firth and second phase.The numbers and capital letters in the figure show the rewilding training areas of different sizes
1.4.1 行為發(fā)育數據的采集
為了減少人類(lèi)活動(dòng)對培訓大熊貓幼仔的干擾，在野化培訓的第一階段，研究人員以紅外視頻監控系統(SCDMS)對幼仔的行為進(jìn)行觀(guān)察。該系統可以遠距離觀(guān)察大熊貓的行為表現和生長(cháng)發(fā)育，了解大熊貓的生存狀況。SCDMS由帶球機(或槍機)的高清攝像機、拾音器、通信光纜和操作平臺(計算機、屏幕和軟件等)組成。
在野化培訓第一階段，每天08:00—23:00對培訓幼仔進(jìn)行行為觀(guān)察，收集從出生至6月齡(僅“淘淘”)或15月齡的行為發(fā)育數據。每天由2人查看視頻或錄像，以30 min(08:00—17:00)或60 min(18:00—23:00)的間隔記錄大熊貓幼仔的行為信息，包括食乳、飲水、爬行、母幼交流、走動(dòng)、爬樹(shù)、咬玩物品(竹子和樹(shù)木)、采食竹子和休息(醒著(zhù)不活動(dòng)或睡著(zhù))等，以及幼仔所處基質(zhì)(母獸身體、地面、草叢、竹堆、木架、樹(shù)干等)。每只幼仔視頻收集數據平均時(shí)長(cháng)達472 d(220~722 d)。
1.4.2 食性數據的采集
1.4.2.1 發(fā)育性食性轉換
在野化培訓第一階段，大熊貓幼仔的覓食行為數據主要根據SCDMS進(jìn)行掃描和記錄。第二階段，大熊貓幼仔的行為由項圈式聲學(xué)記錄裝置(Acoustic Recording Unit,ARU)，即音頻項圈進(jìn)行監測。ARU由錄音機(索尼ICD-PX33M專(zhuān)業(yè)數字錄音機)、鋁蓋、鋁盒、皮帶、防水膠帶、紗布、外部麥克風(fēng)和管道膠帶條組成，總重量小于500 g；
ARU的記錄容量約為120 h，所有記錄都以MP3文件類(lèi)型存儲，以便最大限度地提高存儲容量和電池壽命(Yanet al.,2019)。為了減少大熊貓頸部摩擦和卸載過(guò)程中對記錄數據的影響，每月僅選取中段72 h的數據進(jìn)行行為解譯，對每只大熊貓幼仔聲音按每1 min監聽(tīng)分類(lèi)，并將音頻數據轉換為行為數據(Yanet al.,2019)。音頻數據共監聽(tīng)解譯6 912 h，每只幼仔平均約461 h。
為了訓練行為解譯人員，我們選擇了520 h的視頻同步錄音數據，采用全部事件和關(guān)鍵事件抽樣方法進(jìn)行測試。通過(guò)分析源自視頻記錄的行為與源自音頻記錄的數據之間的一致性，以及量化評估解譯人員對源自音頻行為數據的監聽(tīng)分類(lèi)的準確性，統計結果表明受過(guò)訓練的人員能夠從聲音記錄中分辨出10種野化培訓大熊貓幼仔的行為，音頻采樣法與視頻采樣法對于每個(gè)單獨的行為具有高度的一致性，10種行為的Kappa系數均高于0.90；
解譯人員的行為監聽(tīng)準確率較高，大多數觀(guān)察者相關(guān)的Kappa系數均大于0.91，單個(gè)觀(guān)察者系數為0.81，行為分類(lèi)的準確率達93.80%~99.50%(Yanet al.,2019)。
1.4.2.2 季節性食性轉換
為了跟蹤野化培訓大熊貓幼仔和母獸的活動(dòng)位置和生存狀況，在進(jìn)入第二階段野化培訓圈之前，我們給每只大熊貓佩戴了無(wú)線(xiàn)電頸圈(幼仔)和具有無(wú)線(xiàn)電發(fā)射功能的GPS頸圈(幼仔、母獸)，使其適應佩戴頸圈的生活。無(wú)線(xiàn)電頸圈重量為50 g(幼仔)，GPS頸圈重量300~350 g(幼仔)或800~1 200 g(母獸)，頸圈對大熊貓的活動(dòng)不會(huì )產(chǎn)生影響(Durninet al.,2004；
周世強等，2012)。
在第二階段野化培訓圈，每月對每只大熊貓(包括幼仔和母獸)采集2~3份新鮮糞便樣品進(jìn)行分析，以確定其食物選擇特征。由于竹子通過(guò)大熊貓的消化系統后形態(tài)特征相對不變，因此很容易分離出竹筍、竹莖和竹葉(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Weiet al.,1999,2017)。糞便的收集和分析遵循通用的方法，即研究人員根據野化培訓大熊貓幼仔和母獸的無(wú)線(xiàn)電信號或GPS定位信息，進(jìn)入培訓圈內，使用膠手套和可密封的塑料袋采集留存的新鮮糞便樣品。將樣品放置于60℃的恒溫烤箱中烘干至恒重，并通過(guò)糞便中的干重來(lái)估計食物中所含竹筍、竹莖和竹葉的比例(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Weiet al.,2017)。2016年3月—2018年12月，共收集150份野化培訓大熊貓幼仔和母獸的新鮮糞便樣品。
1.5.1 發(fā)育性食性轉換中母乳與竹子比例的計算
以單位時(shí)間內，動(dòng)物某一行為出現次數(視頻觀(guān)察)或出現時(shí)間(音頻解譯)作為該行為的計量數值(Martin and Bateson,1986；
周小平等，2005)。為此，我們把在一定時(shí)間范圍內(以幼仔月齡為單位時(shí)間)，視頻觀(guān)察或音頻監聽(tīng)中野化培訓大熊貓幼仔食母乳或竹子的頻次或解譯時(shí)數，與視頻觀(guān)察或監聽(tīng)解譯的采食行為總頻次(N)或總時(shí)數(T,min)之比，作為大熊貓幼仔發(fā)育性食性轉換中母乳與竹子的比例，公式如下：
式中，Rm為大熊貓視頻中食母乳占采食行為的比例(%)，Rb為視頻中食竹子占采食行為的比例(%)，nm為視頻中食母乳的頻次(n)，nb為視頻中食竹子的頻次(n)，Pm為音頻解譯中食母乳占采食行為的比例(%)，Pb為音頻解譯中食竹子占采食行為的比例(%)，tm為音頻解譯的食母乳的時(shí)長(cháng)(min)，tb為音頻解譯的食竹子的時(shí)長(cháng)(min)，N為視頻中采食行為總頻次(n)，T為音頻解譯的采食行為總時(shí)長(cháng)(min)。
根據不同月齡野化培訓大熊貓采食母乳和竹子比例的變化曲線(xiàn)，對發(fā)育性食物轉換規律進(jìn)行階段劃分。
1.5.2 季節性食性轉換中竹筍、竹莖和竹葉所占比例的計算
鑒于第二階段野化培訓圈內主要分布的是拐棍竹，因此季節性食性轉換中竹筍、竹莖和竹葉所占比例的計算主要以糞便中拐棍竹進(jìn)行分析，野生大熊貓的季節性食性轉換資料采用20世紀80年代的采樣分析結果(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985)。不同季節(月份)竹筍、竹莖和竹葉在糞樣中所占百分比的計算公式如下：
式中，Fi為竹筍、竹莖和竹葉在糞樣所占百分比，mi為不同季節(月份)內竹筍、竹莖和竹葉在糞樣中的測定重量(g)，n為糞樣中竹筍、竹莖和竹葉的類(lèi)別總數。
1.5.3 數據的統計分析
野化培訓大熊貓行為發(fā)育和覓食行為數據來(lái)源于2010—2020年《野化培訓大熊貓行為觀(guān)察記錄表》、音頻頸圈記錄數據的解譯和第二階段野化圈內糞便樣品的烘干測定。所有數據的統計、分析和圖形制作都在Origin 2020軟件中進(jìn)行；
野化培訓大熊貓食母乳和竹子的比例，幼仔、母獸和野生大熊貓不同季節對主食竹竹筍、竹莖和竹葉的利用率均在Microsoft Excel 2016軟件中計算。采取One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test方法檢驗各項數據的正態(tài)分布性和方差齊性，對正態(tài)分布的行為發(fā)育數據和不同季節的食性轉換數據(P＞0.05)，采用單因素方差分析(One-Way ANOVAs)和多重比較(Fisher LSD法)；
非正態(tài)分布的發(fā)育性食性轉換數據(P＜0.05)，使用非參數檢驗(Kruskai-Wallis ANOVA法或Mann-Whitney Test法)和多重比較(Dunn’s Test法)(葉衛平等，2019)。數據以平均值±標準差(mean±SD)表示，統計檢驗的顯著(zhù)性水平設置為0.05。
通過(guò)紅外視頻監控系統(SCDMS)和現場(chǎng)觀(guān)察，對野化培訓大熊貓幼仔的行為發(fā)育時(shí)間進(jìn)行了記錄和統計，結果表明，與大熊貓幼仔覓食竹子和警戒逃避相關(guān)的行為，除食乳外(大熊貓幼仔通常在出生4~5 h后便可食乳)，共有8種主要行為，包括爬行、走動(dòng)、攀爬、玩耍物品、爬樹(shù)、咬玩竹子、飲水和采食竹子(圖2)，行為出現時(shí)間(月齡)在不同行為間有顯著(zhù)性差異(df1=7,df2=86,F=43.481 1,P＜0.000 1)；
行為出現時(shí)間與發(fā)育年齡(月齡)具有很強的時(shí)間關(guān)聯(lián)性(線(xiàn)性擬合：Person’s=0.847 2,R2=0.717 7,P＜0.000 1)，依次為爬行、走動(dòng)、攀爬、玩耍物品、咬玩竹子、飲水和采食竹子(圖2)。野化培訓大熊貓幼仔對竹子的最初采食時(shí)間平均出現在10月齡左右，一般8、9月齡時(shí)開(kāi)始采食竹子(主要以竹葉為主)，最早觀(guān)察到5月齡時(shí)嘗試采食竹葉的行為，最晚約在14月齡(圖2)。此外，具有警戒逃避或進(jìn)行“日光浴”的爬樹(shù)行為約在5月齡出現(圖2)。
圖2 野化培訓大熊貓幼仔的行為發(fā)育進(jìn)程.圖中小空方框為某一行為的平均出現時(shí)間，上下短橫線(xiàn)為某一行為出現的最晚時(shí)間和最早時(shí)間Fig.2 The behavior development process of pre-released giant panda cubs.The small empty box in the figure is the average occurrence time of a certain behavior,and the upper and lower short horizontal lines are the latest time and the earliest time of a certain behavior
根據野化培訓大熊貓幼仔食性中母乳和竹子所占百分比的月齡動(dòng)態(tài)，發(fā)現隨著(zhù)大熊貓幼仔身體的發(fā)育成長(cháng)，培訓個(gè)體的食性變化從主要以帶仔母獸的乳汁為食物來(lái)源，逐漸轉換成母乳與竹子混合的食物譜，最終過(guò)渡到以培訓圈內分布的主食竹為攝食對象(圖3)。為此，可以將野化培訓大熊貓幼仔的發(fā)育性食性轉換過(guò)程劃分成3個(gè)階段：以大熊貓母獸乳汁為食的食乳期(Milk feeding period)(1~7月齡)、以食母乳—食竹子混合為食的轉換期(Conversion period)(8~28月齡)和以竹子為主食的食竹期(Bamboo feeding period)(29~39月齡)；
其中食物轉換期又可細分為關(guān)鍵期(Critical period)(8~18月齡)和過(guò)渡期(Transition period)(19~28月齡)兩個(gè)階段。
圖3 野化培訓大熊貓幼仔不同月齡食物組分的變化Fig.3 Changes of food components of pre-released giant panda cubs at different months of age
結果表明，以帶仔母獸乳汁所占百分比計算，食乳期大熊貓幼仔食乳為100%，轉換期平均為(37.39±39.55)%，食竹期為0%，三期之間及兩兩之間的非參數檢驗都差異極顯著(zhù)(P＜0.000 1)；
以主食竹所占百分比計算，大熊貓幼仔食乳期為0%、轉換期為(62.65±39.05)%，食竹期為100%，不同食性階段之間及兩兩之間差異極顯著(zhù)(P＜0.000 1)。如果將轉換期內的兩個(gè)小階段納入總體進(jìn)行統計分析，無(wú)論是以母乳還是竹子計算，除過(guò)渡期與食竹期兩者之間無(wú)顯著(zhù)差異之外(母乳：P=1.000 0；
主食竹：P=0.982 8)，總體和其他兩兩之間都差異極顯著(zhù)(P＜0.000 1)；
關(guān)鍵期中母 乳 占(55.80±38.36)%、竹 子 占(44.30±37.93)%，過(guò)渡期中母乳占(4.78±6.25)%、竹子占(94.93±6.39)%。
野化培訓大熊貓幼仔在不同季節對于竹筍、竹莖和竹葉的采食利用與帶仔母獸和野生大熊貓具有相似的變化規律(圖4a，b，c)，表現為春季(4—6月)主要以竹筍(拐棍竹)為食，占(80.00±41.40)%；
少量采食竹莖和竹葉，分別占(17.86±37.58)%和(2.14±8.00)%。夏秋季(7—10月)偶爾取食竹筍，占(19.04±40.24)%；
主要以竹莖(幼嫩竹子)和竹葉為食，分別占(41.70±42.94)%和(39.25±42.36)%。冬季(11月至次年3月)主要取食竹葉與竹莖，分別占(65.11±42.03)%和(34.89±42.03)%。
統計檢驗表明：野化培訓大熊貓幼仔不同季節糞便中所含竹筍、竹莖和竹葉的百分比與母獸之間無(wú)顯著(zhù)差異，春季、夏秋季和冬季分別為P=0.302 2~0.362 4、P=0.212 9~0.516 7和P=0.433 4(圖4d，e，f），與野生大熊貓比較，除春季竹葉(P=0.637 5）、夏秋季竹筍(P=0.363 7)含量之間差異不顯著(zhù)外，其他季節的竹筍、竹莖和竹葉含量都具有極顯著(zhù)差異(P＜0.000 1)(圖4g，h，i)。
圖4 野化培訓大熊貓幼仔與母獸及野生大熊貓不同月份食物組分的比較.*P＜0.05，**P＜0.01；
a：野化培訓大熊貓；
b：帶仔母獸；
c：野生大熊貓(Schaller et al.,1985；
胡錦矗等，1985)；
d：野化培訓大熊貓幼仔與母獸春季食物的比較；
e：野化培訓大熊貓幼仔與母獸夏秋季食物的比較；
f：野化培訓大熊貓幼仔與母獸冬季食物的比較；
g：野化培訓大熊貓與野生大熊貓春季食物的比較；
h：野化培訓大熊貓與野生大熊貓夏秋季食物的比較；
i：野化培訓大熊貓與野生大熊貓冬季食物的比較Fig.4 Comparison of food components among pre-released panda cubs,female mothers and wild pandas in different months.*P＜0.05,**P＜0.01;a:Pre-released panda cubs;b:Training mother pandas;c:Wild pandas(Schaller et al.,1985;Hu et al.,1985);d:Comparison of spring diet between pre-released cubs and mother pandas;e:Comparison of summer-autumn diet between pre-released cubs and mother pandas;f:Comparison of winter diet between pre-released cubs and mother pandas;g:Comparison of spring diet between pre-released cubs and wild pandas;h:Comparison of summer-autumn diet between pre-released cubs and wild pandas;i:Comparison of winter diet between pre-released cubs and mother pandas
野化培訓大熊貓幼仔在4~6月齡之前與圈養大熊貓幼仔都是由繁殖母獸進(jìn)行哺乳和育幼，因而具有相似的生長(cháng)發(fā)育規律，只是所居小環(huán)境不同(前者生長(cháng)于半野化圈，后者成長(cháng)在人工獸舍)；
野化培訓大熊貓幼仔采食竹子為和母獸共同生活期間的自主采食，而圈養幼仔則為人工提供、被動(dòng)選擇。從2010—2020年15只野化培訓大熊貓幼仔的行為發(fā)育進(jìn)程統計結果來(lái)看，除食乳外，其他行為(如爬行、走動(dòng)、攀爬、玩耍物品、爬樹(shù)、咬玩竹葉、飲水和采食竹子等)的發(fā)育時(shí)間與圈養大熊貓幼仔基本相似(Zhanget al.,1996;Penget al.,2001)。
在母獸帶仔野化培訓期間，個(gè)別大熊貓幼仔在發(fā)育到5月齡時(shí)就有食竹葉的行為，一般在8~10月齡時(shí)攝食竹莖和竹葉，此結論與臥龍地區野生大熊貓的研究結論相同(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985)。本研究觀(guān)察到1例大熊貓幼仔14月齡才取食竹子，這一現象可能與大熊貓個(gè)體發(fā)育遲緩，或視頻監控期間停電，或第二階段佩戴音頻頸圈時(shí)機選擇不佳，造成數據遺漏有關(guān)，提示我們今后需加強數據收集的完整性、實(shí)時(shí)性和準確性。
由于野生大熊貓繁殖育幼的隱蔽性和抗干擾能力弱等特點(diǎn)，致使難以獲得野生大熊貓幼仔的生長(cháng)發(fā)育、母幼關(guān)系等數據，無(wú)法了解幼仔完整的發(fā)育性食性轉換過(guò)程。目前僅見(jiàn)臥龍地區間斷性的大熊貓覓食行為特征(食乳、食竹等)描述，秦嶺地區通過(guò)視頻監控系統的短時(shí)間觀(guān)察結果(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Luet al.,1994;Zhuet al.,2001；
潘文石等，2001)。圈養繁殖的大熊貓幼仔常常因為母獸參與下一個(gè)繁殖季節的發(fā)情配種，而在4~6月齡時(shí)被強制斷奶，后續主要以人工奶、精飼料和竹子為食，無(wú)法保證發(fā)育性食性轉換的自然特性(張和民等，2003；
張志和和魏輔文，2006)。因此，本研究通過(guò)第一階段的紅外視頻監控系統(SCDMS)和第二階段的音頻頸圈數據監聽(tīng)解譯(ARU listening interpretation)，使母獸帶仔野化培訓技術(shù)為大熊貓母獸哺乳、幼仔食乳、食母乳—食竹子轉換規律等研究提供了條件(李德生等，2011；
張和民等，2013;Yanet al.,2019)。
通過(guò)分析野化培訓大熊貓幼仔不同月齡食母乳和竹子行為比例，發(fā)現大熊貓幼仔的發(fā)育性食性轉換過(guò)程大致劃分為3個(gè)階段：食乳期(1~7月齡)、食母乳—食竹子轉換期(8~28月齡)和食竹期(29~39月齡)；
食母乳—食竹子轉換期細分成關(guān)鍵期(8~18月齡)和過(guò)渡期(19~28月齡)兩個(gè)小階段，統計檢驗表明關(guān)鍵期與過(guò)渡期、食乳期和食竹期之間具有極顯著(zhù)差異，而過(guò)渡期與食竹期之間差異不顯著(zhù)。由此可以看出，野化培訓大熊貓與野生大熊貓的斷奶時(shí)間顯著(zhù)不同，野生大熊貓母獸大約在幼仔10~11月齡時(shí)就停止哺乳(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985)，而野化培訓大熊貓則大多數在8~10月齡才開(kāi)始少量采食竹葉，18月齡時(shí)母乳仍占據其食物組分較大比例(44.30±37.93)%，8~14月齡母乳高于竹子，15~18月齡則是竹子高于母乳。造成野化培訓與野生大熊貓之間斷奶時(shí)間差異的原因，可能與野外難以近距離跟蹤觀(guān)察、無(wú)線(xiàn)電頸圈信號強弱無(wú)法準確判定采食行為，以及很難捕捉到母獸和幼仔生活在一起的時(shí)機等有關(guān)，致使覓食行為等相關(guān)數據缺失；
也可能與野化培訓圈的空間范圍較小，竹子資源有限，導致大熊貓母獸與幼仔常常生活在一起，大熊貓幼仔對母獸具有較強的依賴(lài)性，對此需要進(jìn)一步的研究。從過(guò)渡期[竹子平均占(94.93±6.39)%]與食竹期(100%)之間無(wú)顯著(zhù)性差異來(lái)看，18月齡后大熊貓幼仔可以離開(kāi)母獸獨立生活，這從培訓期間部分母獸發(fā)情、驅離幼仔和因母獸意外死亡、幼仔仍生存良好的現象得到佐證，并且與野外大熊貓的研究結論一致(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985)。
竹筍在大熊貓食物組分以及生長(cháng)發(fā)育、繁殖生理等方面具有重要性，將竹筍、竹莖和竹葉作為分析大熊貓食性轉換中主食竹資源的組分，以洞悉野化培訓大熊貓幼仔的季節性食性轉換規律，及其與帶仔母獸、野生大熊貓食性轉換特性的異同。統計野化培訓大熊貓幼仔不同月份糞便中竹筍、竹莖和竹葉的含量以及與帶仔母獸和野生大熊貓的比較，結果表明，野化培訓大熊貓幼仔的季節性食性轉換隨著(zhù)季節的變化具有與帶仔母獸、野生大熊貓較為相似的動(dòng)態(tài)格局，即野化培訓大熊貓幼仔在主食竹新筍萌發(fā)的春季主要取食竹筍，夏秋季以嫩竹莖和竹葉為食，冬季采食竹葉與竹莖。該結論不僅與圈養大熊貓的季節性覓食行為變化相似(Dierenfeldet al.,1982；
張和民等，2003；
張志和和魏輔文，2006;Hansenet al.,2009)，而且與不同山系大熊貓的季節性食性轉換規律一致(Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Weiet al.,1999,2017；
胡錦矗，2001；
潘文石等，2001;Nieet al.,2015;Liet al.,2016)，從而說(shuō)明母獸帶仔野化培訓方式的可行性和科學(xué)性。同時(shí)，野化培訓大熊貓的季節性食性轉換規律也佐證了圈養動(dòng)物雖然為了適應人工環(huán)境，其遺傳、生理、形態(tài)和行為等在一定程度上有所改變，甚至某些功能喪失，但經(jīng)過(guò)放歸前的“野化訓練”或階段性適應，可以獲得或激發(fā)野外環(huán)境生存的技能和本能(Kleiman,1989;Sarrazin and Barbault,1996;Vickery and Mason,2003;Tenhumberget al.,2004;Mcphee and Carlstead,2010;Pérezet al.,2012;Germanoet al.,2015)。食物為動(dòng)物生存和種群繁衍的物質(zhì)基礎，對食物的獲取和選擇是形成動(dòng)物最佳覓食策略的行為體現(Goldizenet al.,1988;Fryxell,1991;Rubenstein and Wikelski,2003;Lambert and Rothman,2015;Houet al.,2018;Heckeret al.,2021)，因此，野化培訓大熊貓幼仔覓食行為的季節性轉換規律不僅是評估野化培訓成效的依據，也是培訓大熊貓放歸自然后能否健康生存的預測指標。
驅使野化培訓大熊貓幼仔形成季節性食性轉換的因素主要包括兩個(gè)方面，一是跟隨母獸的行為學(xué)習，探尋竹筍、竹莖和竹葉的可食性；
二是與野生大熊貓和圈養大熊貓具有相同的原因，就是竹筍、竹莖和竹葉中的營(yíng)養成分和次生化合物的季節變化以及大熊貓對這種變化的進(jìn)食反應，這可能是最為主要的動(dòng)力機制(Dierenfeldet al.,1982;Schalleret al.,1985；
胡錦矗等，1985;Weiet al.,1999,2017；
胡錦矗，2001；
潘文石等，2001;Hansenet al.,2009;Nieet al.,2015;Liet al.,2016;Wanget al.,2017,2020;Huanget al.,2018；
周世強，2021)。
圈養繁殖大熊貓幼仔在母獸帶仔野化培訓期間獲得了良好的生存訓練與環(huán)境適應，隨著(zhù)個(gè)體的生長(cháng)發(fā)育，展現出與圈養和野生大熊貓極為相似的行為發(fā)育進(jìn)程和季節性覓食行為策略，以及階段性特征明顯的發(fā)育性食物轉換規律，這為今后圈養大熊貓的野化放歸研究帶來(lái)了一些有益的啟示。(1)分析野化培訓大熊貓幼仔在半野化圈、野化培訓圈和野外環(huán)境的行為發(fā)育與生存適應，不僅說(shuō)明圈養動(dòng)物環(huán)境豐容(Environmental enrichment)技術(shù)的科學(xué)性，也體現出野化培訓條件多樣(生境結構、食物資源、海拔梯度)的重要性，有利于形成大熊貓的自然特性(Swaisgoodet al.,2001；
張和民等，2013;Yanget al.,2018)，而且暗示人們可以采用在野生大熊貓小種群區域內進(jìn)行“就地培訓、就地放歸”模式，從而提高野化培訓大熊貓幼仔的環(huán)境適應性與生存力，有利于野化大熊貓從培訓環(huán)境到放歸環(huán)境的自然過(guò)渡，降低培訓個(gè)體回捕運輸、放歸轉運過(guò)程中的應激反應(唐丹等，2019)。(2)野化培訓大熊貓幼仔發(fā)育性食性轉換過(guò)程揭示了母獸帶仔野化培訓的必要性，因為母乳在提高初生幼仔成活率方面具有至關(guān)重要的作用，且幼仔食乳時(shí)間較長(cháng)，甚至接近2.5歲(李德生等，1999；
張和民等，2003；
張志和和魏輔文，2006)；
同時(shí)野化培訓幼仔食性轉換中過(guò)渡期(18~28月齡)與食竹期(29~39月齡)之間無(wú)顯著(zhù)差異，表明可以適當縮短母獸帶仔野化培訓的時(shí)間長(cháng)度，幼仔1.5歲后就可適時(shí)放歸野外，以便減輕對野化培訓圈竹子資源的利用壓力、延長(cháng)野化培訓圈的使用壽命、提高圈養繁殖大熊貓的野化培訓效率。(3)綜合野化培訓大熊貓幼仔的發(fā)育性和季節性食性轉換特征，提示一方面培訓幼仔放歸野外的時(shí)間可以選擇在大熊貓1.5歲(18月齡)和2.5歲(30月齡)的初春時(shí)節(3—4月)進(jìn)行，此時(shí)正值大熊貓棲息地內主食竹新筍萌發(fā)，幼仔放歸后有充足的優(yōu)質(zhì)食物資源供其選擇利用；
另一方面成年大熊貓母獸可能出現發(fā)情跡象(3—5月)，并主動(dòng)驅離幼仔，這在野化培訓期間已有觀(guān)察，當采取母獸分離措施后，培訓幼仔仍生長(cháng)發(fā)育良好。同時(shí)，也驗證了大熊貓幼仔1.5~2.5歲離開(kāi)母獸，獨立生活的野外研究結論(Schalleret al.,1985;Luet al.,1994；
胡錦矗等，1985；
胡錦矗，2001；
潘文石等，2001;Zhuet al.,2001)。
致謝：中國大熊貓保護研究中心臥龍核桃坪基地的技術(shù)人員，以及曾參與圈養大熊貓野化培訓的工作人員為數據收集付出了艱辛的勞動(dòng)；
四川省南充市林業(yè)局的羅蓉同志參與了部分工作；
美國佛羅里達大學(xué)野生動(dòng)物生態(tài)與保護系Vanessa Hull助理教授幫助修改英文。特此致謝。
